TP SYBR 2x Master Mix
TP SYBR 2x Master Mix je určený pro univerzální analýzu vzorků pomocí metody qPCR s kvantifikací amplifikovaných DNA fragmentů pomocí fluorescenčního DNA barviva SYBR Green I. Vychází z nedávného nálezu, že přidání Trehalózy a 1,2-Propandiolu (zkráceně TP) do reakční směsi může podstatně zvýšit účinnost PCR a napomoci při amplifikaci obtížně analyzovatelných vzorků, včetně DNA z neseparované krve, se zvýšeným obsahem GC a vzorků, které obsahují inhibitory PCR (Horáková a spol., BMC Biotechnology, 11:41, 2011).
| Kat. č. | Název | Balení | Cena | |
|---|---|---|---|---|
| T605 | TP SYBR 2x Master Mix | 40 reakcí, 0,5 ml | 540,00 Kč | |
| T606 | TP SYBR 2x Master Mix | 200 reakcí, 5x 0,5 ml | 2 160,00 Kč | |
| T607 | TP SYBR 2x Master Mix | 1000 reakcí, 25x 0,5 ml | 8 640,00 Kč | |
| T607xl | TP SYBR 2x Master Mix | 4x 1000 reakcí, 100x 0,5 ml | 25 920,00 Kč |
Popis produktu
TP SYBR 2x Master Mix je určený pro univerzální analýzu vzorků pomocí metody qPCR s kvantifikací amplifikovaných DNA fragmentů pomocí fluorescenčního DNA barviva SYBR Green I. Vychází z nedávného nálezu, že přidání Trehalózy a 1,2-Propandiolu (zkráceně TP) do reakční směsi může podstatně zvýšit účinnost PCR a napomoci při amplifikaci obtížně analyzovatelných vzorků, včetně DNA z neseparované krve, se zvýšeným obsahem GC a vzorků, které obsahují inhibitory PCR (Horáková a spol., BMC Biotechnology, 11:41, 2011).
SYBR green I
- Produkt obsahuje interkalační DNA barvivo SYBR Green I, které se po navázání na dvouvláknovou DNA stává fluorescenční s maximální excitací při 497 nm (modré světlo) a emisí při 520 nm (zelené světlo). Protože fluorescence SYBR Green I nenavázaného na DNA je nízká, je nárůst fluorescence vzorku na konci elongační fáze PCR reakce přímo úměrný množství amplifikovaných fragmentů DNA.
Rychlá příprava vzorků
- Produkt obsahuje všechny konstantní komponenty pro qPCR 2x koncentrované (optimalizovaný reakční pufr s přídavkem trehalózy a 1,2-propanediolu, nukleotidy, Taq DNA polymerázu, SYBR Green I). To umožňuje rychlou přípravu reakční směsi bez nutnosti rozmrazování a přesného dávkování jednotlivých komponent. Stačí dodat primery, templátovou DNA a eventuálně doplnit H2O (součást balení).
- TP SYBR 2x Master Mix je mimořádně vhodný pro rutinní vyšetřování větších počtů vzorků DNA. K roztoku TP SYBR 2x Master Mixu v originální zkumavce (0,5 ml) je možné přidat požadované primery (např. 2 x 40 µl) a PCR H2O (např. 380 µl). Vlastní přípravu PCR lze pak omezit pouze na smíchání části této reakční směsi (např. 24 µl) s analyzovanou DNA popřípadě ředěnou krví (např. 1 µl).
Technické údaje
Komponenty základního balení
- 1 zkumavka s 0,5 ml TP SYBR 2x Master Mixu (na 40 reakcí po 25 µl).
- 1 zkumavka s 1,5 ml PCR Ultra H2O.
Skladování
- Skladovat při teplotě -20°C ± 5°C. Materiál snáší opakované rozmrazování.
- Krátkodobě (dny) při 2°C - 8°C.
Složení
- TP SYBR 2x Master Mix obsahuje: 150 mM Tris-HCl, pH 8,8 (25°C), 40 mM (NH4)2SO4, 0,4 M trehalóza, 2 M 1,2-propandiol, 0,02% Tween 20, 5 mM MgCl2, 400 µM dATP, 400 µM dCTP, 400 µM dGTP, 400 µM dTTP, Taq DNA polymeráza (50 U/ml), SYBR Green I, stabilizátory a aditiva.
Kontrola kvality
- Každá šarže TP SYBR 2x Master Mixu je testována na amplifikaci genu o jedné kopii v genomové DNA s vysokým obsahem GC.