LA Hot Start Master Mix
Jedná se o optimalizovaný mix k univerzálnímu použití v PCR. Obsahuje směs dvou DNA polymeráz, deoxyribonukleotid trifosfáty (dNTP), barvivo, anti-Taq monoklonální protilátku, pufr, stabilizátory, aditiva a další komponenty. Tento produkt je nejpokročilejší varianta PCR Master mixu.
| Kat. č. | Název | Balení | Cena | |
|---|---|---|---|---|
| L608 | LA Hot Start Master Mix | 40 reakcí, 0,5 ml | 640,00 Kč | |
| L609 | LA Hot Start Master Mix | 200 reakcí, 5x 0,5 ml | 2 560,00 Kč | |
| L610 | LA Hot Start Master Mix | 1000 reakcí, 25x 0,5 ml | 10 240,00 Kč | |
| L610xl | LA Hot Start Master Mix | 4x 1000 reakcí, 100x 0,5 ml | 30 720,00 Kč |
Popis produktu
Jedná se o optimalizovaný mix k univerzálnímu použití v PCR. Obsahuje směs dvou DNA polymeráz, deoxyribonukleotid trifosfáty (dNTP), barvivo, anti-Taq monoklonální protilátku, pufr, stabilizátory, aditiva a další komponenty. Tento produkt je nejpokročilejší varianta PCR Master mixu.
Rychlá příprava, 500 μl alikvoty
- 2x koncentrovaný mix je alikvotovaný po 500 μl. To snižuje možnost kontaminace a umožňuje rychlou přípravu vzorků. Stačí dodat specifické oligonukleotidové primery, templátovou DNA a doplnit H2O (součást balení).
LA (Long and Accurate)
- Mix obsahuje unikátní směs dvou DNA polymeráz. Jednou z nich je Taq DNA polymeráza, která je vysoce procesivní, ale postrádá 3´→5´ exonukleázovou aktivitu a není schopna opravovat chyby v podobě nukleotidových záměn při syntéze komplementárního řetězce DNA. Druhá polymeráza je méně procesivní, ale vykazuje 3´→5´ exonukleázovou aktivitu a tím snižuje množství chyb vzniklých při replikaci DNA. Kombinace těchto dvou polymeráz vede k výraznému snížení chyb při zachování vysoké robustnosti. To umožňuje amplifikaci úseků DNA do velikosti 15 kb (v případě komplexní genomové DNA) nebo až 40 kb (v případě virové DNA) s podstatně nižším výskytem mutací ve srovnání se samotnou Taq DNA polymerázou.
Hot Start
- Mix obsahuje monoklonální protilátku, která se váže na DNA polymerázy a tím blokuje jejich enzymatickou aktivitu a zamezuje amplifikaci nespecifických DNA fragmentů. Vazebná kapacita protilátky je zrušena při prvním denaturačním cyklu PCR, bez nutnosti jeho prodlužování.
Okamžité nanášení na gel
- K vzorkům po PCR není nutné přidávat vkládací pufr. Mix obsahuje barvivo a aditiva, která umožňují nanesení vzorku na gel a elektroforézu hned po ukončení PCR.
- Barvivo migruje v čele gelu a neinterferuje tak s kvantifikovatelností PCR produktů. Barvivo ani aditiva nemají vliv na průběh amplifikace.
Vysoká účinnost a citlivost
- Mix umožňuje velmi účinnou a specifickou amplifikaci požadovaných fragmentů DNA nebo cDNA; obsahuje MgCl2 v koncentraci vhodné pro většinu reakcí.
Technické údaje
Komponenty základního balení
- 1 zkumavka - 0,5 ml La Hot Start Master Mix (na 40 reakcí o objemu 25µl).
- 1 zkumavka - 1,5 ml PCR H2O.
Skladování
- Krátkodobě (dny) lze skladovat při teplotě 4 - 30°C. To snižuje nároky na přepravu (Nature friendly).
- Dlouhodobě skladovat při teplotě -20 ± 5°C.
- Materiál snáší opakované rozmrazování.
Složení
- LA Hot Start Master Mix se dodává 2x koncentrovaný: 150 mM Tris-HCl, pH 8,8 (25 °C ), 40 mM ( NH4)2SO4 , 0,02% Tween 20, 5 mM MgCl2, 400 µM dATP, 400 µM dCTP, 400 µM dGTP, 400 µM dTTP, 100 U/ml směsi DNA polymeráz, monoklonální protilátka anti-Taq (38 nM), barvivo, stabilizátory a aditiva.
Čistota produktu a kontrola kvality
- Čistota polymeráz je ověřována elektroforeticky (SDS-PAGE). Preparát neobsahuje nukleázy.
- Každá šarže LA Hot Start Master Mixu je testována na amplifikaci genu o jedné kopii v genomové DNA.